ABSTRACT The objective of the study was to evaluate the effect of chloroquine (CQ) on human lymphocytes through the Comet Assay. Lymphocytes were isolated from peripheral blood samples obtained from three healthy, non-smoking donors aged 24 to 30 years. The isolated lymphocytes were exposed for one hour to various treatments: hydrogen peroxide 2.5% (positive control), saline buffer phosphate 1X (negative control) and chloroquine at concentrations of 0 µg/ml, 0.25 µg/ml; 5 µg/ml and 300 µg/ml. The averages of the percentage of DNA in the comet tail, moment of tail and moment of Olive’s tail were recorded, with significant differences between the different concentrations of CQ (p<0.01). Also, the magnitude of DNA damage was increased as a function of the CQ concentration. The genotoxic effect of CQ was demonstrated in human lymphocytes exposed in vitro.

RESUMEN El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de cloroquina (CQ) en linfocitos humanos a través del ensayo cometa. Los linfocitos fueron aislados de muestras de sangre periférica obtenidas de tres donantes sanos, no fumadores de 24 a 30 años. Los linfocitos aislados fueron expuestos durante una hora a diversos tratamientos: peróxido de hidrógeno 2,5 % (control positivo), buffer fosfato salino 1X (control negativo) y cloroquina a concentraciones de 0 µg/ml, 0,25 µg/ml; 5 µg/ml y 300 µg/ml. Se registró los promedios del porcentaje de ADN en la cola del cometa, momento de la cola y momento de la cola de Olive, encontrándose diferencias significativas entre las diversas concentraciones de CQ (p<0,01). Asimismo, la magnitud de daño del ADN se incrementó en función de la concentración de CQ. Se demostró el efecto genotóxico de CQ en linfocitos humanos expuestos in vitro.

The aim of the research was to evaluate the chemopreventive effect of Caesalpinia spinosa against the genetic damage induced by cyclophosphamide in polychromatic erythrocytes of Rattus norvegicus Holtzman strain, using the micronucleus (MN) test. We worked with groups of five individuals and randomly applied the treatments: a) negative control, water; b) C. spinosa, aqueous extract 20 mg/ml; c) C. spinosa-cyclophosphamide, 50 mg/kg/bw; d) positive control: cyclophosphamide 50 mg/kg/bw. The individuals were sacrificed and processed to obtain the cytological preparations. The analysis revealed that the frequency of MN in micronucleated polychromatic erythrocytes treated with cyclophosphamide was 8.81 ± 0.52, while the frequency of MN in the C. spinosa- cyclophophamide group was 5.53 ± 0.78. It was demonstrated that the aqueous extract of C. spinosa has a preventive effect by significantly decreasing the frequency of MN in individuals exposed to cyclophosphamide.

La investigación tuvo por finalidad evaluar mediante el ensayo de micronúcleos (MN) el efecto quimiopreventivo de Caesalpinia spinosa frente al daño genético inducido por ciclofosfamida en eritrocitos policromáticos de Rattus norvegicus cepa Holtzman. Se trabajó con grupos de cinco individuos y de manera aleatoria se aplicaron los tratamientos: a) control negativo, agua; b) C. spinosa, extracto acuoso 20 mg/ml; c) C. spinosa- ciclofosfamida, 50 mg/kg/pc; d) control positivo: ciclofosfamida 50 mg/kg/pc. Los individuos fueron sacrificados y procesados para la obtención de los preparados citológicos. El análisis reveló que la frecuencia de MN en eritrocitos policromáticos micronucleados (EPCMN) tratados con ciclofosfamida fue 8,81 ± 0,52, mientras que la frecuencia de MN en el grupo C. spinosa-ciclofosfamida fue 5,53 ± 0,78. Se demostró que el extracto acuoso de C. spinosa presenta efecto preventivo al disminuir significativamente la frecuencia de MN en los individuos expuestos a ciclofosfamida.

The objective of the study was to evaluate the effect of chloroquine (CQ) on human lymphocytes through the Comet Assay. Lymphocytes were isolated from peripheral blood samples obtained from three healthy, non-smoking donors aged 24 to 30 years. The isolated lymphocytes were exposed for one hour to various treatments: hydrogen peroxide 2.5% (positive control), saline buffer phosphate 1X (negative control) and chloroquine at concentrations of 0 µg/ml, 0.25 µg/ml; 5 µg/ml and 300 µg/ml. The averages of the percentage of DNA in the comet tail, moment of tail and moment of Olive’s tail were recorded, with significant differences between the different concentrations of CQ (p<0.01). Also, the magnitude of DNA damage was increased as a function of the CQ concentration. The genotoxic effect of CQ was demonstrated in human lymphocytes exposed in vitro.

El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de cloroquina (CQ) en linfocitos humanos a través del ensayo cometa. Los linfocitos fueron aislados de muestras de sangre periférica obtenidas de tres donantes sanos, no fumadores de 24 a 30 años. Los linfocitos aislados fueron expuestos durante una hora a diversos tratamientos: peróxido de hidrógeno 2,5 % (control positivo), buffer fosfato salino 1X (control negativo) y cloroquina a concentraciones de 0 µg/ml, 0,25 µg/ml; 5 µg/ml y 300 µg/ml. Se registró los promedios del porcentaje de ADN en la cola del cometa, momento de la cola y momento de la cola de Olive, encontrándose diferencias significativas entre las diversas concentraciones de CQ (p<0,01). Asimismo, la magnitud de daño del ADN se incrementó en función de la concentración de CQ. Se demostró el efecto genotóxico de CQ en linfocitos humanos expuestos in vitro.